用保守引物扩增鲁道夫对盲囊线虫Contracaecum rudolphii姊妹种和C．septentrionale rDNA第一内转录间隔区(ITS-1)片段并纯化，根据鲁道夫对盲囊线虫A、鲁道夫对盲囊线虫B和C．septentrionale rDN ITS-1序列，选用限制性内切酶Msp Ⅰ和Nsi Ⅰ酶切，酶切产物用琼脂糖凝胶电泳分析．结果经Msp Ⅰ酶切后，鲁道夫对盲囊线虫姊妹种与C．septentrionale表现出不同的条带；经Nsi Ⅰ酶切后，鲁道夫对盲囊线虫B和C．septentrionale结果一致，与鲁道夫对盲囊线虫A不同．用MspI可以鉴定出C．septentrionale，用Nsi Ⅰ可以鉴定出鲁道夫对盲囊线虫A，2个限制性内切酶合用可以将鲁道夫对盲囊线虫A、鲁道夫对盲囊线虫B以及C．septentrionale分别鉴定出来．根据鲁道夫对盲囊线虫A、鲁道夫对盲囊线虫B以及C．septentrionale rDNA ITS-1基因序列建立的鲁道夫对盲囊线虫姊妹种PCR-RFIP鉴别技术能够对鲁道夫对盲囊线虫姊妹种进行准确、特异和简便的鉴别．