2017, Vol. 38
2. 江苏农牧科技职业学院，江苏 泰州 225300
2. Jiangsu Agri-animal Husbandry Vocational College, Taizhou 225300, China
激素在哺乳动物生长发育过程中具有不可替代的调控作用，其中直接调控乳腺发育和泌乳的激素主要有雌激素(Estrogen, E)、孕酮(Progesterone，P4)、催乳素(Prolactin, PRL)、生长激素(Growth hormone, GH)、胰岛素(Insulin, INS)和氢化可的松(Hydrocortisone, HC)等[1-2]，它们与转化生长因子β1(Transforming growth factor β1，TGF-β1)、信号转导和转录激活因子5(Signal transducer and activator of transcription 5，STAT5) 和胰岛素样生长因子1(Insulin-like growth factor I，IGF-I)等[3]细胞因子相互作用而形成乳腺发育和泌乳的调控网络。目前运用中药组方对人和小鼠等动物催乳或回乳的研究已有报道[4-5]，均显示与泌乳激素及相关因子呈一定的相关性[6-7]，而奶牛经过泌乳期，机体消耗严重，需要经过回乳期进入干乳期，进而恢复自身体质及更新乳腺组织，为下一个泌乳期做充分准备，但传统回乳方式效果差，易产生乳房炎、流产和抗生素残留等副作用[8]，因此，回乳中药组方在奶牛回乳期的运用有着较广阔的研究前景[9]。探究回乳中药组方对回乳期奶牛血清泌乳相关激素、因子、日产奶量及回乳时间的影响，有助于研究开发奶牛乳房保健产品、改进奶牛回乳方法、降低回乳期奶牛乳房炎发生率。本研究旨在探究中药组方“回乳康”对回乳期奶牛血清E、P4和TGF-β1含量的影响，为进一步研究中药组方对回乳期奶牛相关泌乳激素的调控机理奠定基础，并为更安全有效的回乳技术措施提供理论依据。
1 材料与方法 1.1 试验动物选择四川省某规模化奶牛场半封闭统一舍饲，体质量(582±41) kg、2~4胎中国荷斯坦奶牛150头。从中选取体况良好，乳房、乳汁均正常，即将进入回乳期，日产奶量为(15.42±0.71) kg的妊娠后期健康奶牛80头。随机分为4组(包括1个对照组和3个中药组)，每组20头。各组均采用逐渐干奶法回乳，回乳当天记为第0天，对照组不饲喂中药，从第1天开始，3个中药组每日8:00分别饲喂中药组方“回乳康”400、500和600 g，直至停奶，停止饲喂中药。
1.2 回乳方式本试验采用逐渐干奶法回乳[10-11]，方法为：停喂多汁饲料，减少精料喂量，以青干草为主，控制饮水，适当加强运动。在回乳第1天，挤奶次数由3次改为2次，第2天改为1次，逐渐减少挤奶频率，当奶牛日产奶量为3~5 kg时，停止挤奶。
1.3 试验药物和试剂中药组方“回乳康”由四川农业大学动物医学院奶牛疾病研究中心研发。由麦芽、朴硝、升麻、柴胡、香附、薏仁、蚕蜕、白术、黄芩、知母、苏梗、芡实、五味子、蒲公英和甘草等组成。
牛E、P4和TGF-β1双抗体夹心ELISA试剂盒，均由美国RD公司提供。
1.4 试验方法 1.4.1 血清收集试验奶牛回乳开始当天记为第0天，依次采集第0、1、3、5、7、9和11天尾静脉血10 mL，置于未加抗凝剂的离心管中，室温下静置1 h，1 800 r·min-1离心10 min，转移上层血清于EP管中，-20 ℃冻存，待检。
1.4.2 ELISA检测采用双抗体夹心ELISA测定牛E、P4和TGF-β1的含量，步骤按照说明书进行。
1.5 统计分析利用SPSS 9.0软件进行统计学分析，K-S检验计量资料是否服从正态分布，数据结果以平均数±标准差表示，2组间采用独立样本t检验，多组间比较采用LSD单因素方差分析，相关性分析采用双变量Pearson相关分析。
2 结果与分析 2.1 “回乳康”对回乳期奶牛日产奶量的影响如表 1所示，各组奶牛日产奶量在回乳期均呈下降趋势，回乳期分别为11、7、5和5 d，回乳第0天，各组间奶牛日产奶量差异均不显著(P＞0.05)；第1天，400 g中药组奶牛日产奶量极显著高于600 g中药组(P＜0.01)；第3~5天，对照组、400 g中药组奶牛日产奶量均极显著高于600 g中药组，且对照组奶牛日产奶量极显著高于400 g中药组；第7天，对照组奶牛日产奶量极显著高于400 g中药组；500、600 g中药组奶牛日产奶量在整个回乳期差异均不显著。结果表明中药组方“回乳康”具有较好回乳效果。
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表 1 中药组方“回乳康”对回乳期奶牛日产奶量的影响1) Table 1 The effects of Chinese herbal formula "Huirukang" on milk production of dairy cows during the milk withdrawal period |
如表 2所示，各组奶牛血清E含量在回乳期均呈下降趋势。回乳第0至1天，各组奶牛血清E含量差异均不显著；第3—11天，对照组奶牛血清E含量极显著高于其他3组，其中第3—7天，400 g中药组奶牛血清E含量极显著高于500、600 g中药组；500、600 g中药组奶牛血清E含量在整个回乳期差异均不显著。结果表明中药组方“回乳康”可促使回乳期奶牛血清E含量降低。
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表 2 中药组方“回乳康”对回乳期奶牛血清E含量的影响1) Table 2 The effects of Chinese herbal formula "Huirukang" on serum estrogen levels of dairy cows during the milk withdrawal period |
如表 3所示，对照组奶牛血清P4含量在回乳期无明显变化，400、500、600 g中药组均呈先上升后下降的趋势。回乳第0—1天，各组奶牛血清P4含量差异均不显著；从第3天开始，对照组奶牛血清P4含量较其他组低，于第3天显著低于500、600 g中药组，第5—11天则显著低于其他3组。500、600 g中药组P4含量在整个回乳期差异均不显著。结果表明中药组方“回乳康”可促使回乳期奶牛血清P4含量上升。
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表 3 中药组方“回乳康”对回乳期奶牛血清P4含量的影响1) Table 3 The effects of Chinese herbal formula "Huirukang" on serum progesterone levels of dairy cows during the milk with-drawal period |
如表 4所示，各组奶牛血清TGF-β1含量在回乳期均呈上升趋势，并在回乳期后下降。回乳第0—3天，各组间TGF-β1含量差异均不显著；第7天，对照组、400 g中药组TGF-β1含量极显著高于500、600 g中药组；第9—11天，400 g中药组TGF-β1含量极显著高于其他3组；500、600 g中药组TGF-β1含量在整个回乳期差异均不显著。结果表明中药组方“回乳康”可促使回乳期奶牛血清TGF-β1含量上升。
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表 4 中药组方“回乳康”对回乳期奶牛血清TGF-β1含量的影响1) Table 4 The effects of Chinese herbal formula "Huirukang" on serum TGF-β1 levels of dairy cows during the milk with-drawal period |
如表 5所示，在整个回乳期，奶牛血清E、TGF-β1含量和日产奶量两两间均呈极显著相关，血清P4含量与E、TGF-β1含量、日产奶量相关性不显著。
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表 5 回乳期奶牛血清PRL、P4、TGF-β1含量与日产奶量的相关性1) Table 5 Correlation between serum estrogen, progesterone and TGF-β1 levels and daily milk yield during the milk with-drawal period |
目前，口服麦芽，外敷芒硝等方式促进哺乳期妇女回乳的研究已报道较多[12-13]。叶琳[14]使用麦芽、蒲公英和神曲等使妇女乳汁减少至无乳，王雄[4]使用“回乳抑增一号”(麦芽、牡蛎、浙川贝等)使妇女溢乳改善，郝振华等[5]使用麦芽治疗妇女产后溢乳有明显疗效。现有回乳中药组方中多有麦芽，且已人工合成麦角衍生物——卡麦角林，其明显抑制PRL生成，控制泌乳的进行[15]。然而，中药组方运用于奶牛回乳鲜见报道，本试验结果显示，中药组方“回乳康”具有较好回乳效果，缩短了奶牛回乳期，且有效减少了日产奶量，推测其机理可能是“回乳康”中炒麦芽消食、回乳[4, 13]；升麻、柴胡、香附、白术疏肝理气；黄芩、知母、苏梗安胎；五味子、蒲公英固精敛阴，清热解毒，统筹全局，断其生化之源，使肝气调达四运，有效抑制乳汁分泌而回乳。500、600 g中药组奶牛日产奶量在整个回乳期差异均不显著，表明“回乳康”剂量达到500 g·d-1时，效果即可达到最佳。
3.2 “回乳康”对回乳期奶牛血清E含量的影响E是卵巢和胎盘合成和分泌的一种类固醇激素，是乳腺发育、泌乳启动与维持必不可少的激素之一[16]。乳腺发育早期，E和各类生长因子协同调控导管上皮末端终芽增生，乳腺发育中、后期，E促进乳腺导管生长，诱导P4受体表达，促进乳腺发育，提高乳腺上皮组织PRL水平，并与E受体(Estrogen receptor，ER)结合直接发挥促乳功能，提高泌乳量[17]。同时，E可诱导GH活性，影响INS敏感性，间接调控乳腺泌乳[18]。郝振荣等[19]和Cools等[20]均发现大豆异黄酮(植物雌激素)可显著提高奶牛泌乳量，说明了血清E含量与泌乳量呈正相关。然而，Berryhill等[21]研究表明E可促进产后妇女回乳。本研究结果显示，在奶牛回乳过程中，随泌乳量逐渐下降，血清E含量呈阶梯式下降趋势，结果与郝振荣等[19]和Cools等[20]对E与泌乳量呈正相关的研究报道一致，可能是由于奶牛回乳期泌乳量下降，PRL降低，使得乳腺ER表达减少[22]，反馈调节E降低。
李萍萍等[23]利用柴胡、丹皮、紫草等组成的中药组方降低了小鼠血清E含量，Tiosano等[24]研究发现18种中药复合物可改变儿童E含量及活性，王丹等[25]利用“参芪解郁颗粒”增加了妇女产后E含量，王小云等[26]利用熟地、白术、泽泻等组成的中药组方显著降低妇女E表达。本研究结果显示，中药组方“回乳康”使回乳期奶牛血清E含量明显降低每天饲喂500 g即可达到最佳效果，且中药组E含量在回乳期后无明显变化，可能是由于奶牛停止泌乳引起。
3.3 “回乳康”对回乳期奶牛血清P4含量的影响P4是介于内分泌和免疫系统交互作用的重要因子，具有促进乳腺小叶及腺泡发育，维持妊娠等作用[27]。陈建晖等[28]研究表明，在E刺激乳腺导管发育的基础上，P4能使乳腺发育更充分，黄利等[29]也指出P4可明显刺激豚鼠乳腺增生，王瑞琼等[30]发现乳腺生长不良孕鼠乳腺组织P4及其受体表达量较低。虽然P4可刺激乳腺发育，但不会刺激乳腺泌乳[31]，夏成等[32]指出奶牛泌乳量与P4含量无明显相关性。本研究结果显示，在奶牛回乳过程中，对照组P4含量在回乳期差异不显著，可能是由于P4主要是妊娠黄体产生，其在奶牛怀孕后期主要功能是抑制子宫肌蠕动，以维持胎犊宫内生长，而对回乳期奶牛泌乳无明显影响。
王丹等[25]利用“参芪解郁颗粒”显著降低妇女血清P4含量，张剑锋等[33]使用黄芩、苏梗、白术等组成的中药组方提升了怀孕妇女P4表达量，保胎效果良好。本研究使用的中药组方“回乳康”能够极显著提高回乳期奶牛血清P4含量，500 g和600 g的“回乳康”饲喂量对奶牛回乳期血清P4含量影响一致，在回乳期结束后，P4含量有一定程度的下降，但各中药组仍极显著高于对照组，表明奶牛回乳期饲喂中药组方“回乳康”能够提高其血清P4含量，且以每天500 g为佳，可能是中药组方“回乳康”中黄芩、苏梗、白术等中药提高了妊娠奶牛血清P4含量，P4含量的升高使子宫内膜和子宫肌松弛，从而保证胎犊宫内正常生长发育。
3.4 “回乳康”对回乳期奶牛血清TGF-β1含量的影响TGF-β1是一种多效细胞因子，可影响上皮细胞增殖、凋亡并维持细胞外基质稳态，对乳腺形态发生及分泌功能有重要作用。已有研究表明，TGF-β1可诱导乳腺上皮干细胞群衰老，抑制乳腺发育，并与乳腺泌乳的终止信号密切相关[34]。另外，TGF-β1可减少乳腺上皮细胞中由PRL诱导的β-酪蛋白mRNA和蛋白表达水平，且对蛋白表达水平的抑制更明显[35]。说明TGF-β1在动物乳腺退化过程中对抑制细胞生长起重要调控作用[36]，Vries等[37]指出TGF-β1含量表达在奶牛回乳后1周内达到最高，本研究发现，在奶牛回乳过程中，随泌乳量逐渐下降，血清TGF-β1含量呈上升趋势，与上述研究结果趋势一致，可能是由于回乳期奶牛机体缺少挤奶刺激，促使乳腺表达TGF-β1，减少β-酪蛋白mRNA和蛋白表达水平，降低奶牛泌乳量。
张臻等[38]使用黄芩、太子参等组成的中药组方提升了大鼠TGF-β1表达量，葛明晓等[39]利用熟地、山药和白术等组成的中药组方增加了妇女血清TGF-β1含量。本研究使用的中药组方“回乳康”可使奶牛快速回乳，回乳期结束后，各中药组TGF-β1含量均有一定程度的下降，缩短了TGF-β1高含量水平及回乳期持续时间，从而降低对细胞增殖的抑制作用，间接促进胎犊生长发育。而对照组变化不明显，可能是由于对照组奶牛回乳持续时间较长，致使TGF-β1还未达到降低期。
3.5 回乳期奶牛血清E、P4、TGF-β1含量和日产奶量的相关性在奶牛乳腺生长发育过程中，E可促进乳腺导管上皮细胞和小叶周围结缔组织生长，诱导P4受体表达，促进P4与E协同刺激乳腺上皮细胞DNA合成和腺泡发育[27]。怀孕后期奶牛E和P4含量均升高，乳腺组织发育迅速，但血液中P4含量过高，抑制了泌乳作用，从而使乳腺虽具备泌乳能力而不泌乳[31]，分娩后，血液中P4浓度降低，PRL才正常发挥泌乳功能。有研究指出，在乳腺退化过程中，TGF-β1在转录水平及蛋白水平上均有所增加[40]，抑制ER表达，诱导乳腺导管快速退化[41]。本研究表明，在奶牛回乳期，E是奶牛回乳的负调控激素，而TGF-β1是奶牛回乳的正调控因子。然而回乳期奶牛血清P4含量与血清E、TGF-β1含量及日产奶量相关性均不显著，可能是由于P4只促进青春期奶牛乳腺发育，而对泌乳期和回乳期奶牛乳腺无明显影响，此时，P4主要是由妊娠黄体分泌，维持妊娠。
| [1] |
OGATA Y, YU G M, HIDAKA T, et al. Effective embryo production from Holstein cows treated with gonadotropin-releasing hormone during early lactation[J]. Theriogenology, 2016, 86(6): 1421-1426. DOI:10.1016/j.theriogenology.2016.04.087 (  0) |
| [2] |
文静, 卜登攀, 王建发, 等. 激素调控乳蛋白合成的作用及其分子机制[J]. 华北农学报, 2012, 27(S1): 111-115. ( 0) |
| [3] |
BACH L A. Insulin-like growth factor binding proteins: An update[J]. Pediatr Endocrinol Rev, 2015, 13(2): 521-530. ( 0) |
| [4] |
王雄. 回乳抑增一号治疗高泌乳素血症与乳腺增生药效学研究[D]. 武汉: 湖北中医药大学, 2012.
( 0) |
| [5] |
郝振华, 郭震兵. 重用生麦芽治疗高泌乳素血症性不孕的临床观察[J]. 新疆中医药, 2016, 34(1): 13-14. ( 0) |
| [6] |
MACRINA A L, KAUF A C, KENSINGER R S. Effect of bovine somatotropin administration during induction of lactation in 15-month-old heifers on production and health[J]. J Dairy Sci, 2011, 94(9): 4566-4573. DOI:10.3168/jds.2011-4394 ( 0) |
| [7] |
WANG J F, FU S P, LI S N, et al. Short-chain fatty acids inhibit growth hormone and prolactin gene transcription via camp/pka/creb signaling pathway in dairy cow anterior pituitary cells[J]. Int J Mol Sci, 2013, 14(11): 21474-21488. DOI:10.3390/ijms141121474 ( 0) |
| [8] |
HENDERSON A C, HUDSON C D, BRADLEY A J, et al. Prediction of intramammary infection status across the dry period from lifetime cow records[J]. J Dairy Sci, 2016, 99(7): 5586-5595. DOI:10.3168/jds.2015-10684 ( 0) |
| [9] |
ZHAO F R, MAO H P, ZHANG H, et al. Antagonistic effects of two herbs in zuojin wan, a traditional chinese medicine formula, on catecholamine secretion in bovine adrenal medullary cells[J]. Phytomedicine, 2010, 17(8/9): 659-668. ( 0) |
| [10] |
ZOBEL G, LESLIE K, WEARY D M, et al. Gradual cessation of milking reduces milk leakage and motivation to be milked in dairy cows at dry-off[J]. J Dairy Sci, 2013, 96(8): 5064-5071. DOI:10.3168/jds.2012-6501 ( 0) |
| [11] |
TUCKER C B, LACY-HULBERT S J, WEBSTER J R. Effect of milking frequency and feeding level before and after dry off on dairy cattle behavior and udder characteristics[J]. J Dairy Sci, 2009, 92(7): 3194-3203. DOI:10.3168/jds.2008-1930 ( 0) |
| [12] |
吴文英, 周惠欢, 吴秀娥. 芒硝外敷治疗产后回奶的观察及护理[J]. 医学信息, 2013, 26(8): 375. ( 0) |
| [13] |
钟慧萍. 炒麦芽泡茶饮用联合芒硝外敷双乳回奶的效果观察[J]. 中外医学研究, 2015, 13(34): 157-159. ( 0) |
| [14] |
叶琳. 少泽穴点刺放血配合蒲公英神曲麦芽煎回乳45例[J]. 陕西中医, 2008, 29(3): 341. ( 0) |
| [15] |
杨强, 陈晋, 刘军. 卡麦角林治疗泌乳素型垂体瘤的研究进展[J]. 中国神经精神疾病杂志, 2016, 42(5): 311-314. ( 0) |
| [16] |
DESSAUGE F, FINOT L, WIART S, et al. Effects of ovariectomy in prepubertal goats[J]. J Physiol Pharmacol, 2009, 60(S3): 127-133. ( 0) |
| [17] |
AGARWAL S K, KIM J, KORST L M, et al. Application of the estrogen threshold hypothesis to the physiologic hypoestrogenemia of lactation[J]. Breastfeed Med, 2015, 10(2): 77-83. DOI:10.1089/bfm.2014.0030 ( 0) |
| [18] |
张贵锋, 吴晓玲, 温鸿源, 等. 针药结合对围绝经期综合征大鼠血清E2、FSH、LH及IGF表达水平的影响[J]. 齐齐哈尔医学院学报, 2016, 37(17): 2143-2145. ( 0) |
| [19] |
郝振荣, 朱志宁, 郭玉琴, 等. 大豆黄酮对产奶量和牛奶品质的影响[J]. 北京农学院学报, 2009, 24(4): 26-27. ( 0) |
| [20] |
COOLS S, BROECK W V D, VANHAECKE L, et al. Feeding soybean meal increases the blood level of isoflavones and reduces the steroidogenic capacity in bovine corpora lutea, without affecting peripheral progesterone concentrations[J]. Anim Reprod Sci, 2014, 144(3): 79-89. ( 0) |
| [21] |
BERRYHILL G E, TROTT J F, HOVEY R C. Mammary gland development:It's not just about estrogen 1[J]. J Dairy Sci, 2016, 99(1): 875-883. DOI:10.3168/jds.2015-10105 ( 0) |
| [22] |
CONNER E E, WOOD D L, SONSTEGARD T S, et al. Chromosomal mapping and quantitative analysis of estrogen-related receptor alpha-1, estrogen receptors alpha and beta and progesterone receptor in the bovine mammary gland[J]. J Endocrinol, 2005, 185(3): 593-603. DOI:10.1677/joe.1.06139 ( 0) |
| [23] |
李萍萍, 王薇, 谢玉泉. 舒肝凉血方对体内雌激素影响的实验研究[J]. 中华肿瘤杂志, 2003, 25(5): 445-447. ( 0) |
| [24] |
TIOSANO D, PARIS F, GRIMALDI M, et al. Evidence of ERalpha and ERbeta selectivity and partial estrogen agonism in traditional chinese medicine[J]. Reprod Biol Endocrinol, 2014, 12(1): 1-14. DOI:10.1186/1477-7827-12-1 ( 0) |
| [25] |
王丹, 赵瑞珍, 李小黎, 等. 补益心脾法对产后抑郁症患者中医证候积分以及雌、孕激素的影响[J]. 北京中医药大学学报, 2015, 38(11): 772-776. DOI:10.3969/j.issn.1006-2157.2015.11.012 ( 0) |
| [26] |
王小云, 张春玲, 莫莉莉, 等. 补肾健脾中药对围绝经期妇女骨代谢和雌激素的影响[J]. 广州中医药大学学报, 2000, 17(3): 230-232. ( 0) |
| [27] |
HILTON H N, GRAHAM J D, CLARKE C L. Minireview: Progesterone regulation of proliferation in the normal human breast and in breast cancer: A tale of two scenarios?[J]. Mol Endocrinol, 2015, 29(9): 1230-1242. DOI:10.1210/me.2015-1152 ( 0) |
| [28] |
陈建晖, 佟慧丽, 李庆章, 等. 胰岛素、催乳素和孕酮对奶牛乳腺上皮细胞泌乳功能的影响[J]. 中国奶牛, 2008(8): 9-13. ( 0) |
| [29] |
黄利, 李利民, 刘之恒, 等. 乳癖2号汤对乳腺增生豚鼠雌孕激素水平及病理形态的影响[J]. 四川中医, 2013, 31(1): 61-63. ( 0) |
| [30] |
王瑞琼, 吴国泰, 刘峰林, 等. 心理应激致孕鼠乳腺发育不良及雌/孕激素和受体水平异常[J]. 中国实验动物学报, 2015, 23(3): 272-277. ( 0) |
| [31] |
丁威, 邢军, 魏全伟, 等. 二花脸猪卵巢卵泡形成和早期发育过程中雌二醇和孕酮含量变化及其受体定位[J]. 江苏农业学报, 2016, 32(2): 383-389. ( 0) |
| [32] |
夏成, 朱玉哲, 徐鹏, 等. 过瘤胃脂肪对泌乳奶牛生殖机能的影响[J]. 中国奶牛, 2010(10): 35-38. DOI:10.3969/j.issn.1004-4264.2010.10.012 ( 0) |
| [33] |
张剑峰, 归绥琪. 中药治疗对反复自然流产患者抗CD抗原封闭效率和血清泌乳素及孕酮的影响[J]. 中国中西医结合杂志, 2004, 24(4): 303-305. ( 0) |
| [34] |
YANG G, ZHOU J, TENG Y, et al. Mesenchymal TGF-β signaling orchestrates dental epithelial stem cell homeostasis through Wnt signaling[J]. Stem Cells, 2014, 32(11): 2939-2948. DOI:10.1002/stem.1772 ( 0) |
| [35] |
KLEINBERG D L, FELDMAN M, RUAN W. IGF-I: An essential factor in terminal end bud formation and ductal morphogenesis[J]. J Mammary Gland Biol Neoplasia, 2000, 5(1): 7-17. DOI:10.1023/A:1009507030633 ( 0) |
| [36] |
ZARZYNSKA J, GAJKOWSKA B, WOJEWODZKA U, et al. Apoptosis and autophagy in involuting bovine mammary gland is accompanied by up-regulation of TGF-beta1 and suppression of somatotropic pathway[J]. Pol J Vet Sci, 2007, 10(1): 1-9. ( 0) |
| [37] |
VRIES L D, CASEY T, DOVER H, et al. Effects of transforming growth factor-β on mammary remodeling during the dry period of dairy cows[J]. J Dairy Sci, 2011, 94(12): 6036-6046. DOI:10.3168/jds.2011-4590 ( 0) |
| [38] |
张臻, 阙华发, 朱元颖, 等. 益气化瘀中药对糖尿病皮肤溃疡大鼠转化生长因子β1的影响[J]. 结合医学学报, 2007, 5(4): 416-420. ( 0) |
| [39] |
葛明晓, 张金玉, 赵彦鹏, 等. 益气血补肝肾中药对体外受精-胚胎移植周期中卵泡液转化生长因子β1和性激素水平的影响[J]. 中国中西医结合杂志, 2011, 31(3): 327-330. ( 0) |
| [40] |
WU W J, LEE C F, HSIN C H, et al. TGF-β inhibits prolactin-induced expression of β-casein by a Smad3-dependent mechanism[J]. J Cell Biochem, 2008, 104(5): 1647-1659. DOI:10.1002/jcb.v104:5 ( 0) |
| [41] |
SERRA R, CROWLEY M R. Mouse models of transforming growth factor β impact in breast development and cancer[J]. Endocr Relat Cancer, 2005, 12(4): 749-760. DOI:10.1677/erc.1.00936 ( 0) |