鸡γ干扰素基因在毕赤酵母中的分泌表达
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广东省重点科技攻关项目(99M04205G)


Secretive expression of chicken interferon-γ gene in Pichia pastoris
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    为了获得高效分泌表达ChIFNγ的重组毕赤酵母菌株,利用基因工程技术,将435 bp的ChIFNγ成熟肽编码基因亚克隆到巴斯德毕赤酵母Pichia pastoris表达载体PPICZαC中,将该重组质粒用BstX Ⅰ线性化并通过电击法转化毕赤酵母X-33菌株,用500 μ/mL抗生素Zeocin筛选高拷贝阳性重组菌.甲醇诱导表达的重组ChIFNγ经SDS-PAGE电泳,可在相对分子质量约2.0×104处检测到目的蛋白带,目的蛋白占酵母表达上清液总蛋白质的35%.微量细胞病变抑制法检测表达产物的生物学活性,检测结果表明,巴斯德毕赤酵母表达的重组ChIFNγ的抗病毒效价为6 400 U/mL.

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引用本文

周庆丰,毕英佐,马静云,陈峰,曹永长.鸡γ干扰素基因在毕赤酵母中的分泌表达[J].华南农业大学学报,2004,25(3):105-108

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