首页 > 按月查看>2005年第3月 >117-119. DOI:10.7671/j.issn.1001-411X.2005.03.033
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表达绿色荧光蛋白重组乳酸杆菌的构建及电击转化条件
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广州市科技攻关重点项目(2003Z2E0221)，广东省农业项目(2003B21403)


Construction of recombinant Lactobacillus expressing green fluorescent protein gene and transformation conditions by electroporation
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    应用DNA重组技术构建了表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组乳酸杆菌．将pGFP2质粒中的绿色荧光蛋白基因切下，克隆进表达载体质粒pThioHisB的NcoⅠ和SacⅠ位点之间，构建成重组表达质粒pThaioGFP，然后转化大肠杆菌B121．从BL21中提取重组质粒，用电击法转化乳酸杆菌Lac1001，当细菌处于D600nm为0．6的生长期时，使用PEB作为电击缓冲液，对100μL体积的细胞悬液在电容25μF，电阻200Ω，电压2．2kV的电击条件进行完整质粒转化可得到较高的转化率．电击转化后Lacl001于LB培养基上呈绿色，在荧光透射仪下观察，整个菌体发绿色荧光．构建的重组乳酸杆菌能够稳定表达绿色荧光蛋白．

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引用本文

田兴山 张玲华 周风珍 李国立 孙晓刚.表达绿色荧光蛋白重组乳酸杆菌的构建及电击转化条件[J].华南农业大学学报,2005,26(3):117-119

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