大肠杆菌O157:H7 eaeA基因的原核表达
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广东省科技厅科技计划 , 广州市农业局攻关项目 , 广东省自然科学基金


Prokaryotic Expression of eaeA Gene of E.coli O157: H7
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    将含广东分离株大肠杆菌O157: H7 021210 eaeA基因的克隆质粒双酶切后,亚克隆至原核表达载体pET-28a( ),经PCR鉴定、酶切鉴定及核苷酸序列测定,正确构建了原核重组表达质粒pET-eaeA.再将该重组质粒转化E.coli BL21 (DE3) pLysS, 经IPTG诱导, 进行SDS-PAGE,结果显示,目的蛋白的相对分子质量约为94 000,与 eaeA基因蛋白的理论值相符.破菌后电泳证实目的蛋白主要以包涵体形式存在.表达蛋白经初步纯化,3次免疫新西兰兔,获得抗 eaeA蛋白的多克隆血清.经琼脂扩散试验和Western-blotting试验,表明该蛋白具有较好的免疫原性和反应原性.

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龚霞,郭霄峰.大肠杆菌O157:H7 eaeA基因的原核表达[J].华南农业大学学报,2007,28(1):109-113

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  • 最后修改日期:2006-06-12
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