H5N1 和 H9N2 亚型禽流感病毒HA基因的原核表达

doi:10.7671/j.issn.1001-411X.2008.02.022

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H5N1 和 H9N2 亚型禽流感病毒HA基因的原核表达
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                        10.7671/j.issn.1001-411X.2008.02.022
                    
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Prokaryotic Expression of Hemagglutinin Genes of AIV H5 and H9 Subtypes

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采用自行设计的引物,通过PCR的方法,分别从pMD-HA5和pMD-HA9中成功扩增出AIV 0025(HSN1)株和KMⅢ(H9N2)株的血凝素(hemagglutinin,HA)基因,然后分别亚克隆到pET-32a( )、pET-28a( )表达载体中,构建并筛选出阳性重组子,分别标记为pET32-HA5、pET28-HA9.将阳性重组质粒转化进B121(DE3)宿主菌中,通过改变IPTG浓度和诱导时间,使重组蛋白获得表达,并确定了最佳诱导条件为IPTG终浓度1.0 mmol/L、诱导时间4～5 h.经SDS-PAGE和 Western-blotting 分析表明,重组蛋白相对分子质量约为85 000和63 000,主要存在于包涵体中,具有良好的免疫学活性.

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黄文科,林宝珍,罗琴芳,牛学锋,郭霄峰. H5N1 和 H9N2 亚型禽流感病毒HA基因的原核表达[J].华南农业大学学报,2008,29(2):90-93

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最后修改日期:2007-10-15
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