首页 > 按月查看>2009年第1月 >. DOI:10.7671/j.issn.1001-411X.2009.01.021
PDF 导出
牛白细胞介素15基因的克隆及在大肠杆菌中的表达
作者:
作者单位:

作者简介:

通讯作者:

基金项目:

广东省省级动物防疫检疫研究专项基金?


Cloning and Expression of Bovine Interleukin-15 in Escherichia coli
Author:
Affiliation:

Fund Project:

  • 摘要
    • |
  • 图/表
    • |
  • 访问统计
    • |
  • 参考文献
    • |
  • 相似文献
    • |
  • 引证文献
    • |
  • 资源附件
    摘要:

    根据GenBankTM中发表的牛IL-15基因序列设计并合成了特异性引物,以经LPS和ConA刺激的牛外周血单个核细胞提取的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增出长度约500 bp的目的基因片段,并将该基因克隆到pMD18-T载体上.酶切、PCR及序列测定结果表明,获得了牛IL-15全长基因的克隆.进一步通过PCR方法得到缺失其N端48个氨基酸的信号肽序列的牛IL-15成熟蛋白基因,将其亚克隆到原核表达载体pET-32a上,构建重组表达质粒pET-IL-15,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,该菌表达以包涵体形式存在的相对分子质量约为33 000的融合蛋白.用Ni螯合层析方法纯化表达的蛋白.Western-blot试验显示表达的重组融合蛋白能与抗6×His的单克隆抗体发生反应,同时也能与鼠抗猪IL-15的多克隆抗体发生明显交叉反应.

    Abstract:

    参考文献
    相似文献
    引证文献
引用本文

房红莹,陈钜豪,张欣,胡寻,罗满林.牛白细胞介素15基因的克隆及在大肠杆菌中的表达[J].华南农业大学学报,2009,30(1):

复制
分享
文章指标
  • 点击次数:
  • 下载次数:
历史
  • 收稿日期:
  • 最后修改日期:
  • 录用日期:
  • 在线发布日期:

您是本站第 访问者   



通信地址： 广州市天河区五山路483号华南农业大学学报编辑部    邮编：510642   电话：(020)85280069/38746672