多重反转录聚合酶链式反应检测H5、H7和H9亚型禽流感病毒的研究
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吉林省科技发展计划项目,吉林农业大学青年启动基金?


Study on Multiplex Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction for Detection of H5,H7 and H9 Subtypes Avian Influenza Virus
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    利用多重反转录聚合酶链式反应同时检测H5、H7和H9亚型禽流感病毒.在GenBank中搜索H5、H7和H9亚型禽流感病毒(AIV)的血凝素基因序列,并利用DNAStar软件分析其相似性,利用Primer Premier 5.0软件设计3对分别针对AIV H5、H7和H9亚型的特异性引物.这3对引物所扩增的cDNA片段大小分别为427、228和830 bp.结果表明,通过对多重RT-PCR扩增条件的优化,建立了同时检测H5、H7和H9亚型AIV的多重RT-PCR技术.该多重RT-PCR对H5、H7和H9亚型AIV能同时扩增出3条大小分别为427、228和830 bp的cDNA片段,与其他常见禽病病原的核酸不存在交叉反应.该多重RT-PCR对H5、H7和H9哑型AIV cDNA的最低检出量分别为10 Pg、1 ng和10 Pg.

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引用本文

张文慧,王伟利,郑聪,刘明,钱爱东.多重反转录聚合酶链式反应检测H5、H7和H9亚型禽流感病毒的研究[J].华南农业大学学报,2009,30(3):

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