摘要:将克隆质粒pMD-18T-H和pMD-18T-F分别进行双酶切,获得纯化的H基因和F基因,在T4 DNA连接酶的作用下,亚克隆到原核表达载体pET28a(+)上, 获得原核重组质粒pET28a-H和pET28a-F.将原核重组质粒转化大肠埃希菌Escherichia coli Rosetta2(DE3)中进行表达,SDS-PAGE结果显示H 基因和F基因分别表达相对分子质量约为31 400和38 200的融合蛋白,Western-blot 检测结果显示,表达蛋白均可与CDV 标准阳性血清呈阳性反应,表明原核表达的CDV H蛋白和F蛋白在反应原性上具有与天然H蛋白和F蛋白同样的特性,可作为CDV诊断用抗原,为CDV的免疫预防研究奠定基础.