摘要:【目的】建立一种新型的、能在基层场地进行实时便捷诊断的猪瘟病毒检测方法。【方法】环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification, LAMP)-横向流动试纸条技术(Lateral flow dipstick, LFD)相结合,针对猪瘟病毒(Classical swine fever virus, CSFV) NS5B基因设计一套特异性引物及生物素标记探针,结合异硫氰酸荧光素标记的扩增产物,建立RT-LAMP-LFD检测方法。【结果】所建立的方法能够特异地检测出CSFV的存在,检测PRRSV、JEV、PCV-2等其他病毒均为阴性;所建立的CSFV-RT-LAMP 方法对RNA的最低检测限为50 pg;反应快速,整个扩增反应可在1 h 内完成;操作简单, 不需要PCR 仪等复杂的仪器,结果可经肉眼观察。【结论】应用RT-LAMP-LFD 检测CSFV特异性强、灵敏度高,并且操作安全、简便、快捷,可以满足基层检疫的需要。