肖武名 , 孙大元 , 张景欣 , 王慧 , 郭涛 , 刘永柱 , 朱小源 , 杨祁云 , 陈志强
2012, 33(3):273-276. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.001
摘要:综合考察水稻苗期叶瘟抗谱和成株期穗颈瘟抗性可以全面地评价水稻种质的稻瘟病抗性.本研究采用来自广东不同稻作区的36个稻瘟病菌株,对经过抗性初筛的3个空间诱变水稻品系进行苗期叶瘟抗谱测定;同时种植于代表性自然诱发病圃——广东省从化市吕田镇,考察其穗颈瘟抗性.结果显示,入选的3个诱变品系具有广谱的苗期叶瘟抗谱、且高抗穗颈瘟,抗性明显优于非诱变原种.遗传分析结果表明,H4和H11对菌株GD0193和GD866的抗性均由主效单基因控制,H4对菌株GD08T4、H11对菌株GD08T13的抗性均由2个独立遗传的显性基因控制,D69对菌株GD0193的抗性遗传模式复杂,D69对菌株GD08T4和GD866的抗性为主效单基因模式.
刘传光 , 周新桥 , 陈达刚 , 周汉钦 , 冯道基 , 李丽君 , 李巨昌 , 张桂权 , 陈友订
2012, 33(3):277-281. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.002
摘要:品种间亲缘系数是研究作物品种间遗传关系和遗传多样性的重要方法.对华南地区不同年代育成的常规籼稻主栽品种的亲缘系数进行了分析.结果显示,近50年来华南地区基于亲缘系数的水稻品种遗传多样性呈“W”型变化,3个高点分别出现在1957年前、1970—1979年和2000—2008年,3个低点分别出现在1957—1969年和1980—1989年.基于亲缘系数的品种聚类结果较直观地反映了近50年来华南地区籼稻品种的遗传关系及其品种演变特点,与该地区不同时期主要围绕着少数几个骨干亲本进行品种改良的特点相吻合.本研究获得的华南地区近50年来水稻品种遗传多样性呈“W”型变化这一结果说明,基于品种间亲缘系数的华南地区品种遗传多样性未经历持续的下降或上升,而是在一定范围内波动.
2012, 33(3):282-287. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.003
摘要:将无花粉型温敏核不育系籼S与不同父本杂交,在籼S不育期内调查F2和BC1F2育性分离.结果表明:8个组合F2及BC1F2群体不育株数∶可育株数均符合1∶3,符合1对主效基因控制的遗传模式;无花粉败育方式可以稳定遗传,但遗传背景会对出现无花粉败育的时间产生影响;各组合F2不育株的不育期长短及可育期育性的差异均达到显著水平,且各组合不同单株间也存在差异;13个组合的不育株不育期长短与可育期育性的相关性差异较大,其中,籼S/金华占、籼S/籼黄占、籼S/新小占、籼S/野绿占、籼S/密粒早占等5个组合达到显著负相关水平.
何铭谦 , 章家恩 , 罗明珠 , 宋春秀 , 赵本良 , 叶延琼 , 严家跃
2012, 33(3):288-295. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.004
摘要:利用GIS技术,结合福寿螺生长发育的特点和广东地区水稻的种植分布情况,预测福寿螺在广东地区的潜在时空分布及其危害风险.结果表明:广东地区存在5种福寿螺潜在生境,分别是:螺和卵都能存活且卵能孵化螺能发育;螺卵存活、螺能发育但卵不孵化;螺存活但不发育、卵不孵化;螺冬眠且不产卵;螺、卵均不能存活.5种生境从南到北依次排列,并且分布范围随着季节的变化而变化.福寿螺适宜生境夏季分布广、冬季分布窄,夏季向北扩展,冬季向南收缩.冬季粤北山区小部分地区福寿螺不能存活,5—10月全省均适宜螺及其卵的生长发育.就潜在分布区而言,全省16.68%地区处于高度发生区,中度发生区也占54.25%.以稻田的危害风险为例,结合水稻分布区的状况评价了福寿螺可能带来的危害风险等级,其中重度风险区占全省面积的21.75%,主要集中于湛江、茂名、阳江等地的稻区;中度风险区集中在广东中部的水稻区,占63.16%;轻度风险区只占14.47%.
肖熙鸥 , 王勇 , 李冠男 , 曹必好 , 雷建军 , 陈国菊 , 陈清华
2012, 33(3):296-300. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.005
摘要:利用ISSR分子标记分析茄子种质多样性,从100条引物中筛选出20条能够扩增出多态性条带稳定清晰的ISSR引物,对48份茄子材料的DNA进行扩增,共获得了186条谱带,其中多态性带153条(占所有谱带的82.2%).利用UPGMA法建立了48份茄子及其近缘野生种间的遗传关系聚类图.聚类结果表明,48份供试种质间的遗传相似系数分布在0.52~0.98之间,可将其分为5大类群.其中又将44份栽培品种分为5组,其品种间相似遗传系数在0.84~0.98之间,表明栽培品种的遗传背景比较窄.聚类结果与茄子的果形以及地理来源有一定的相关性,而与果色呈现不完全相关.
魏永赞 , 赖彪 , 胡福初 , 李晓静 , 胡桂兵 , 王惠聪
2012, 33(3):301-306. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.006
摘要:利用基因克隆和测序,从‘妃子笑’荔枝果皮中获得了β-Actin、GAPDH和18S rRNA 3个qPCR分析常用的内参基因全长序列,其长度分别为1 273、1 368和1 712 bp;3个基因与其他物种高度同源,氨基酸序列相似性均超过了98%.在此基础上,结合已报道的UBQ、eEF和25S rRNA 3个常用的内参基因,对β-Actin、GAPDH、18S rRNA,UBQ、eEF和25S rRNA 6个常用内参基因在荔枝果实发育不同阶段和外源生长调节剂处理后表达稳定性进行了分析,同时比较了geNorm、NormFinder和BestKeeper 3种不同算法的差异.结果表明:以上6个基因中,β-Actin基因在3种不同算法下均保持了较好的表达稳定性.
潘顺顺 , 李家贤 , 孙世利 , 赵超艺 , 黄华林 , 晏嫦妤 , 凌彩金
2012, 33(3):307-310. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.007
摘要:以福鼎大白、翠玉、金萱3个绿茶品种做对比,研究了绿茶品种青心1号叶绿素、黄酮类和茶多酚与绿茶茶汤色泽的关系.结果表明:青心1号绿茶汤色绿艳持久,且极耐冲泡,该品种茶树鲜叶和干茶的叶绿素a、叶绿素b、叶绿素总量都显著高于其他3个品种;各品种干茶黄酮类和茶多酚含量差异较大;各品种干茶中的叶绿素类和黄酮类含量之和与茶汤持绿性呈正相关.因此,茶叶中叶绿素、黄酮类和茶多酚对绿茶汤色均有十分重要的作用,鲜叶和干茶中叶绿素和黄酮类含量越高,茶汤越翠绿、持久,黄酮类含量越高则越偏黄亮,茶多酚含量越高,茶汤色泽越不稳定.
2012, 33(3):311-315. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.008
摘要:为确定适宜人参Panax ginseng叶面喷施的Zn浓度范围,采用田间试验的方法,研究喷Zn浓度对人参生长、皂苷含量及叶片吸收Zn速率的影响.结果表明,人参叶片可有效吸收叶面供给的无机态Zn2+,并可运至根部.在20~20 000 mg/L质量浓度范围内,人参叶片吸收Zn的速率和数量与喷施浓度呈显著正相关(P<0.01,R 2>0.9),而且随着喷施浓度的升高,从叶片向根部运输Zn的数量也升高.喷施适宜质量浓度(200和2 000 mg/L)Zn2+可显著改善人参的Zn营养状况,促进人参生长和皂苷积累,增强叶片过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性.喷施浓度过高,人参叶片受到伤害,丙二醛(MDA)含量增加,CAT活性降低,但人参根皂苷含量显著升高,可能与环境胁迫刺激次生代谢产物积累有关. 适宜人参叶面喷施的Zn质量浓度范围是200~2 000 mg/L.
2012, 33(3):316-320. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.009
摘要:采用盆栽试验,研究了Cd胁迫下不同用量的K2SO4和KCl对油麦菜Lactuca sativa L.品质及土壤的影响.结果表明:Cd胁迫下,适量的K2SO4可提高油麦菜产量,降低可食部分Cd含量,同时油麦菜的硝酸盐含量显著增加,营养品质有所降低;而KCl则表现出相反的趋势.随着钾用量水平的提高,K2SO4和KCl均提高了土壤速效K含量,K2SO4对碱解N和有效P含量影响不显著;在施钾(K2O)水平为400 mg/kg时,2种钾肥处理的土壤pH较不施钾处理有显著降低,土壤DTPA-Cd含量则明显增加.总体上看,在降低油麦菜可食部分Cd含量方面K2SO4优于KCl,提高油麦菜营养品质方面则KCl优于K2SO4,但KCl增加土壤DTPA-Cd含量的风险亦大于K2SO4.
2012, 33(3):321-325. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.010
摘要:在实验室条件下,以不同配比的牛粪和稻秆作为培养基质,研究了赤子爱胜蚓Eisenia foetida在不同碳氮比培养基条件下生物量以及数量变化情况.结果表明:100%牛粪(碳氮比为21.8)和80%牛粪+20%稻秆组合(碳氮比为24.9)堆置30、60、90 d后的蚯蚓生物量显著高于其他处理;60%牛粪+40%稻秆组合(碳氮比为28.7)堆置60和90 d后蚯蚓总数量最多,显著高于其他处理,在第90天达到324条;另外,培养基质的碳氮比与蚯蚓的生物量和数量均呈显著负相关关系(P<0.001).由此可知,碳氮比在21.8~24.9之间的牛粪和稻秆基质组合适宜蚯蚓生长,碳氮比为287的牛粪和稻秆基质组合适宜蚯蚓繁殖.
2012, 33(3):326-330. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.011
摘要:以餐厨垃圾为研究对象,在(37±1)℃的条件下,研究了蚯蚓粪的5种不同添加量对餐厨垃圾厌氧消化过程的影响,并考察了在这过程中pH、溶解性化学需氧量(SCOD)、挥发性脂肪酸(VFAs)、总磷(TP)和产气量的变化规律.研究结果表明:当蚯蚓粪的添加量(w,均以湿基计)为0、3%、6%、9%、12%、15%时,餐厨垃圾厌氧消化系统的累积产量分别为14 700、16 074、15 702、16 056、16 414和16 485 mL,产气率分别达到466.35、504.84、488.02、494.03、499.67、496.69 mL·g -1,与不添加蚯蚓粪相比产气率分别提高了8.25%、4.60%、5.93%、7.14%和6.51%,其中当添加量(w)为3%时对餐厨垃圾厌氧消化效果最明显.研究还发现,蚯蚓粪的添加能显著提高各处理的pH和餐厨垃圾的水解酸化速率.可见,添加蚯蚓粪有助于抑制VFAs的累积,使pH更稳定,从而提高沼气产量.
2012, 33(3):331-335. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.012
摘要:将果蝇置于含印楝素2 mg/kg的昆虫培养基中产卵,待卵孵化发育至不同虫态,运用光学显微镜及扫描电镜研究果蝇新羽化成虫复眼外观,发现复眼明显萎缩并呈现不规则状,表面粗糙,出现异常凹陷,刚毛缺失或增生,排列不规则或弯曲;运用透射电镜研究复眼超微结构,结果表明,3龄末期幼虫复眼组织细胞中染色质高度聚集成小体、小体分散,吞噬泡数量明显增多,核膜皱缩、界限模糊,蛹和新羽化成虫复眼中感光细胞丢失.这些结果确证了印楝素诱导果蝇复眼发育异常,为寻找新型昆虫生长发育调节剂提供了可能的新靶标.
2012, 33(3):336-341. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.013
摘要:利用LI-6400便携式光合仪研究了水稻发生白叶枯病以后叶片光合作用的日变化特征.结果表明:发病植株和对照的净光合速率(Pn)日变化曲线均为“单峰”型,没有明显的光合“午休”现象,这可能与水稻的生育期以及地理环境条件有关.发病植株和对照的Pn以及蒸腾速率(Tr)总量差异不显著,但日变化进程存在明显的差异.相关性分析表明,发病植株的光合作用除了受到光合有效辐射(PAR)的影响外,气孔导度(Gs)也是其主要限制因子.与对照相比,发病植株的气孔特征发生了显著的改变,气孔长度和宽度增加,密度降低,且气孔的分布极不均匀.同时,发病植株与对照的叶绿素总量和类胡萝卜素含量差异显著.发病植株叶绿素a和类胡萝卜素的含量显著低于对照,而叶绿素b的含量显著高于对照.水稻在受到病害胁迫的逆境中,表现出了较强的适应和抵抗能力,植物通过改变结构、性能及代谢方式以满足其生长发育的需求.
2012, 33(3):342-345. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.014
摘要:采用陷阱法、扫网法及植株系统调查法研究了甜玉米间作不同作物(绿豆、菜豆、甘薯、花生)对蜘蛛群落结构的影响.田间调查共采集到蜘蛛26种,隶属于10科.玉米单作与间作生境蜘蛛群落结构组成相似,均以拟环纹狼蛛Lycosa pseudoannulata和八斑球蛛Coleosoma octomaculatum为优势种;但玉米间作生境有助于蜘蛛类群数量增长,其中玉米间作绿豆、玉米间作菜豆的蜘蛛总体数量显著高于玉米单作,玉米间作甘薯和玉米间作花生的蜘蛛数量也有所提高.研究表明,玉米间作生境通过增加作物多样性,对蜘蛛具有较好的诱集作用,从而提高蜘蛛类群数量.
2012, 33(3):346-350. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.015
摘要:研究了高温下番石榴实蝇Bactrocera correcta(Bezzi)各虫态的存活情况.结果表明,在高温条件下,番石榴实蝇各虫态随着试验温度升高和处理时间延长,死亡率显著升高.处理24.0 h卵、幼虫、蛹、成虫的亚致死高温区分别为43.0~44.0、44.0~45.0、38.1~42.3和38.2~43.8 ℃,致死高温区分别为45.0~46.0、>46.0、42.4~45.5和43.8~45.7 ℃.番石榴实蝇蛹、成虫死亡率(Y)与温度(X1)、处理时间(X2)之间的二次多项式方程分别为Y=828.63-45.22X1-11.45X2+0.616X21+0.300 4X1X2和Y=3 902.87-194.73X1- 7.722X2+2.424X21 +0.200 4X1X2.研究结果为该虫的检疫处理和风险预警等提供了科学依据.
2012, 33(3):351-355. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.016
摘要:采用转录组测序和荧光定量PCR等方法,分析了蔬菜害虫黄曲条跳甲lpl基因(Pslpl基因)的cDNA序列及基因表达情况.结果表明,Pslpl基因cDNA的开放阅读框为1 182 bp,编码393个氨基酸,N端含有13个氨基酸的线粒体信号肽.Pslpl基因在黄曲条跳甲雌、雄成虫的不同组织器官中都有表达,头部和中肠相对较高.雌、雄成虫之间对比分析发现,雄虫各组织器官Pslpl基因表达量均比雌虫对应组织器官中的表达量低,但在生殖系统中相反.Pslpl基因cDNA的鉴定和表达分析为研究黄曲条跳甲硫辛酸蛋白连接酶的功能及蛋白硫辛酸修饰奠定了前期基础.
2012, 33(3):356-360. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.017
摘要:为了寻找新的植物源杀菌剂,采用菌丝生长速率法测定了17种植物提取物对荔枝霜疫霉病菌Peronophythora litchi的抑菌活性.结果显示:辣蓼Polygonum lapathifolium、白花油茶Camellia oleifera甲醇提取物(干粉)10 mg/mL处理7 d后的抑菌率分别达74.37%、77.02%,而甘草Glycyrrhiza uralensis根甲醇提取物相同质量浓度时的抑菌率达到97.83%;甲醇对甘草的提取率为23.04%,甘草的甲醇提取物1和5 mg/mL处理对荔枝霜疫霉病菌菌丝生长的抑菌率分别为63.84%和80.68%,对荔枝霜疫霉病菌孢子囊芽管萌发的抑制中质量浓度(EC50)为0.47 mg/mL,对荔枝霜疫霉病菌、辣椒疫霉病菌Phytophthora capsici、芒果炭疽病菌Colletotrichum gloeosporioides、香蕉枯萎病菌Fusarium oxysporum f. sp.cubense和草莓叶斑病菌Cladosporium herbarum菌丝生长的EC50依次为0.62、0.89、9.70、6.42 和4.53 mg/mL,表明甘草甲醇提取物具有较好的抑菌活性,有望继续研究开发成新的杀菌剂.
秦新生 , 何科稣 , 刘立武 , 孙君梅 , 齐旭明 , 施浩
2012, 33(3):361-367. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.018
摘要:通过样方调查对海南俄贤岭石灰岩山地海南凤仙花Impatiens hainanensis所在群落的植物区系及生态特征进行了分析.结果表明,在总面积为800 m2的样地中,共记录了维管植物46科76属83种(含种下单位),以兰科(16种)、水龙骨科(5种)和大戟科(4种)等为优势.属的区系成分以泛热带分布(18属)和热带亚洲(印度-马来西亚)分布(15属)为主.群落以灌木层(29种)和草本层(45种)为主,灌木层以海南大戟Euphorbia hainanensis为优势,草本层以玫瑰毛兰Eria rosea占优势;藤本层植物9种,以眼树莲Dischidia chinensis为优势.生活型以矮高位芽(57种)为主.频度等级分布规律为A>B>D>C>E,属于A级的种类最多,有41种,其中草本层20种.与相同生境的海南大戟灌丛群落进行了比较,并对其有效保护提出了初步建议.
2012, 33(3):368-372. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.019
摘要:以灰木莲Manglietia glauca、木麻黄Casuarina equisetifolia、乐昌含笑Michelia chapensis幼苗为试验材料,人工模拟水淹胁迫环境,研究了水淹胁迫对这3种幼苗叶片5项生理指标的影响.结果表明,随着水淹持续时间的延长,灰木莲的叶片叶绿素含量小幅波动后急剧升降,木麻黄先微降后上升,而乐昌含笑小幅波动,峰值在(1.73±0.02)~(2.37±0.02)mg·g-1之间;灰木莲的可溶性糖含量在水淹初期下降后又回升,木麻黄则不断上升,乐昌含笑先升后降,峰值在(3.21±0.14)%~(4.96±0.34)%之间;灰木莲的蛋白质含量波动大,木麻黄小幅波动后下降,乐昌含笑先升后降,峰值在(17.97±0.83)~(28.10±2.16)mg·g-1之间;灰木莲、乐昌含笑的叶片超氧化物歧化酶(SOD)活性呈逐渐下降的趋势,而木麻黄先升高后下降,峰值在(177.39±4.86)~(183.94±1.71)U·g-1之间;灰木莲和乐昌含笑的丙二醛(MDA)含量均有上升,而木麻黄保持稳定, 峰值在(0.018±0.001)~(0.037±0.002)μmol·g-1之间.主成分分析综合评价得出3个树种的抗涝性为:木麻黄>灰木莲>乐昌含笑.
2012, 33(3):373-377. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.020
摘要:对海南红豆Ormosia pinnata、南五味子Kadsura longipedunculata、蒲桃Syzygium jambos和灰木莲Magnoliaceae glanca幼苗进行3 ℃的低温处理后,研究其叶片气体交换参数的变化,了解低温下这4种树种的光合生理.结果表明,随着低温时间的延长,4种幼苗的净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Tr)不断下降;海南红豆、南五味子和灰木莲幼苗叶片的细胞间隙CO2的摩尔分数(xCO2)持续上升,气孔限制值(Ls)持续下降;蒲桃的xCO2先降后升,Ls先升后降.低温胁迫6 d时,海南红豆、南五味子、蒲桃和灰木莲的Pn分别为-0.17、-0.21、0.27和0.15μmol·m-2·s-1,Gs分别为0.005、0.017、0.003和0.006 mol·m-2·s-1,xCO2分别为440.8、439.6、309.8和404.8 μmol·mol-1,Tr分别为0.11、0.39、0.09和0.11 mmol·m-2·s-1,Ls分别为0.046、0.047、0.268和0.103.主成分分析表明,低温下幼苗的光合能力为蒲桃>灰木莲>南五味子>海南红豆.
2012, 33(3):378-383. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.021
摘要:依据越冬期间叶片内脯氨酸、可溶性糖等渗透调节物质含量及电解质渗透率的变化,对尾叶樟Cinnamomum camphora、猴樟C.bodinieri和樟C.caudiferum 3种樟树的自然降温胁迫响应特性及抗寒能力进行对比研究.结果表明:自然降温过程中,12月中旬前,渗透调节物质含量及电解质渗透率变化不明显,可能与低温持续时间较短,且气温又时有回升相关;进入1月后,连续4 d-8℃的低温(1月5—8日)造成了渗透调节物质含量的迅速增加.与12月28日相比,1月9日3种樟树可溶性蛋白含量分别增加了16.59%、43.44%和24.29%,可溶性含量分别增加了8.19%、21.27%和16.72%,其中猴樟和樟的增幅均达到显著水平.之后,随着气温的持续降低,过度的低温胁迫导致渗透调节物质含量下降和电解质渗透率上升;春季,随着气温的逐渐回升,渗透调节物质含量又略有上升,而电解质渗透率则呈明显的下降态势.结合隶属函数法的应用,得出自然越冬过程中樟树的抗寒性呈先增强后减弱再增强的变化.综合评价结果显示,抗寒性强弱顺序为:猴樟>樟>尾叶樟,这与越冬期间外部形态观察的结果基本一致.
2012, 33(3):384-387. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.022
摘要:采用苏丹黑B染色法、甲醇-氯仿法,从30份土壤样品中筛选到9株产油霉菌和4株产油酵母.经5.8S rDNA序列分析,9株产油霉菌分别为蓝状菌Talaromyces trachyspermus、嗜松青霉Penicillium pinophillum、青霉Pe. sp.、微紫青霉Pe. janthinellum、淡紫拟青霉Paecilomyces lilacinus、简青霉Pe. simplicissimum.、棘孢曲霉Aspergillus aculeatus、木霉Trichoderma sp.、拟康宁木霉Tr. koningiopsis,4株产油酵母分别是毕赤酵母Pichia caribbica、假丝孢酵母Candida sp.、季也蒙酵母Meyerozyma guilliermondii和季也蒙毕赤酵母Pi. guilliermondii.通过摇瓶培养,测定了各菌株的产油量,结果表明:霉菌产油量最高的是嗜松青霉,产油量为26.4%;酵母产油量最高的是假丝孢酵母,产油量为44.3%.提取毕赤酵母的油脂,采用气相色谱-质谱联用分析,测得其油脂成分主要是14~20碳的短链脂肪酸.
石俊松 , 罗绿花 , 周荣 , 周秀 , 麦然标 , 李紫聪 , 吴珍芳
2012, 33(3):388-392. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.023
摘要:从猪卵巢上获取的卵母细胞经体外培养成熟42~44 h后去除颗粒细胞,选取成熟的卵母细胞进行孤雌激活培养.试验采用不同的场强、脉冲时程和脉冲次数进行对照试验,并比较了细胞松弛素B(CB)辅助激活对孤雌胚胎发育的影响.结果显示:1)当场强为0.8 kV·cm-1,选取4个脉冲时程(80、100、120、140 μs)参数分别进行1次、2次脉冲激活时,100 μs、1次脉冲囊胚率最高,为(42.22±5.38)%,但同其他组无显著差异(P>0.05).2)脉冲时程为100 μs,选取4个场强(0.8、1.0、1.2、1.4 kV·cm-1)参数分别进行1次、2次脉冲激活时,1.4 kV·cm-11次脉冲囊胚率最高,为(44.04±0.68)%,但同其他组无显著差异(P>0.05).3)场强为0.8 kV·cm-1和1.4 kV·cm-1,选取4个脉冲时程(80、100、120、140 μs)进行1次脉冲激活时,1.4 kV·cm-1+80 μs组囊胚率(54.60±2.86)%均高于其他组,且极显著高于1.4 kV·cm-1+140 μs、0.8 kV·cm-1+80 μs和0.8 kV·cm-1+140 μs组(P<0.01).4)用1.4 kV·cm-1、80 μs、1次脉冲激活卵母细胞后,使用CB辅助激活4 h的囊胚率为(54.07±3.12)%,极显著(P<0.01)高于不使用CB组.以上结果说明,电激活中脉冲次数对猪孤雌胚胎发育无显著影响,且在本试验条件下,采用1.4 kV·cm-1的场强、80 μs的脉冲时程,并使用CB辅助激活4 h,能够得到较高囊胚率的猪孤雌激活效率.
陈春丽 , 郭宇飞 , 陈筱薇 , 叶昱 , 王强 , 廖明 , 樊惠英
2012, 33(3):393-397. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.024
摘要:利用pCold-SUMO可溶性原核表达载体,构建表达猪圆环病毒2型缺失核定位信号肽的Cap基因的重组表达载体pCold-SUMO-dCap,并将其转入Arctic-Express表达菌株中15 ℃低温诱导表达.表达产物经SDS-PAGE分析,结果表明SUMO-dCap融合蛋白获得了高效表达,可溶性SUMO-dCap融合蛋白约占总融合蛋白的50%;用NI-NTA树脂纯化可溶性的融合蛋白,然后利用SUMO蛋白酶特异性去除SUMO标签,从而得到不含任何标签的dCap蛋白,进一步的Western-blot分析表明,表达的dCap蛋白具有良好的反应原性.
陈筱薇 , 樊惠英 , 林文耀 , 程晓亮 , 叶昱 , 陈春丽 , 廖明
2012, 33(3):398-402. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.025
摘要:以鸡传染性支气管炎病毒M41毒株基因序列为模板,利用PCR方法扩增膜定位信号缺失的S1基因(dS1),将其亚克隆入杆状病毒表面展示质粒pBACsurf-1中,再次将S1及gp64的基因片段克隆到杆状病毒转移质粒pFastBacTMDual,得到重组质粒pFastBac-gp64-dS1.将该重组质粒转化到DH10Bac感受态细胞中,获得重组穿梭载体Bacmid-gp64-dS1,提取重组Bacmid质粒, 以PCR验证其正确性.将阳性重组Bacmid质粒利用脂质体转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒BV-dS1.间接免疫荧光试验表明,该重组杆状病毒可以Sf9昆虫细胞膜表达鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白.
2012, 33(3):403-406. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.026
摘要:50日龄健康岭南三黄肉鸡24只随机分为2组,雌雄各半.分别进行单剂量(10 mg·kg-1)静注和内服洛克沙胂的药物动力学(简称药动学)研究.以反相高效液相色谱法测定血浆中洛克沙胂质量浓度,采用WinNonlin 5.2药动学软件的非房室模型统计矩原理分析药物质量浓度-时间数据.鸡静注给药后主要药动学参数为: t1/2β=(2.37±0.11)h,Vz =(5.29±0.37)L·kg-1,AUC0-∞=(6.55±0.28)mg·L -1·h,CL=(1.56±0.07) L·h-1·kg-1.内服给药的主要药动学参数为: t1/2β=(3.02±0.08) h,tmax= (1.00±0.07) h,Cmax= (1.09±0.08)mg·L-1,AUC0-∞=(2.30±0.10) mg·L-1·h,MRT=(2.44±0.13) h,F =(35.28±1.0)%.洛克沙胂在鸡体内的药动学特征表现:静注分布较为广泛,消除迅速;内服给药后,吸收较快但不完全,生物利用度较低.
2012, 33(3):407-410. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.027
摘要:通过研究青藤碱、防己诺林碱、水苏碱、川芎嗪、苦参碱和吴茱萸碱6种中药生物碱对细菌内毒素(LPS)作用下猪血管内皮细胞分泌细胞因子白介素-1α(IL-1α)、NO和6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)的影响,探讨生物碱抗LPS的药理作用机制.培养猪血管内皮细胞至单层融合状态,加入LPS刺激,3 h后加入高、中、低3种质量浓度的上述6种中药生物碱,继续培养21 h后收集细胞上清液,用ELISA测定IL-1α、NO和6-keto-PGF1α的含量.结果显示青藤碱、苦参碱和吴茱萸碱能显著降低内皮细胞分泌IL-1α的水平;青藤碱、水苏碱和川芎嗪能显著降低内皮细胞分泌NO的水平;防己诺林碱能显著降低内皮细胞分泌6-keto-PGF1α的水平.结果提示6种中药生物碱具有明显的抗细菌内毒素作用,可在由IL-1α、NO和6-keto-PGF1α介导的机体炎症、水肿和凝血等病理损伤过程中发挥治疗作用.
2012, 33(3):411-416. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.028
摘要:采用溶胶-凝胶法制备核-壳式结构的TiO2/Fe3O4负载型光催化剂,并对其进行中间层改性,制备出TiO2/SiO2/Fe3O4光催化材料.研究了pH等制备条件对TiO2/Fe3O4材料光催化性能的影响,并对比了改性前后降解甲基橙的光催化性能,通过X射线衍射仪(XRD)、红外光谱仪(FT-IR)、振动样品磁强计(VSM)和透射电子显微镜(TEM)对改性前后颗粒的磁性能、晶相和形貌进行了表征.研究表明:磁性负载光催化剂TiO2/Fe3O4和TiO2/SiO2/Fe3O4均为超顺磁性,且光催化性能较高,在1 h内甲基橙脱色率达90%以上,其降解反应均属于一级动力学反应;SiO2中间层的引入可显著提高材料的饱和磁化强度、光催化速率和循环使用的光催化活性.
2012, 33(3):417-420. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.029
摘要:将克隆质粒pMD-18T-H和pMD-18T-F分别进行双酶切,获得纯化的H基因和F基因,在T4 DNA连接酶的作用下,亚克隆到原核表达载体pET28a(+)上, 获得原核重组质粒pET28a-H和pET28a-F.将原核重组质粒转化大肠埃希菌Escherichia coli Rosetta2(DE3)中进行表达,SDS-PAGE结果显示H 基因和F基因分别表达相对分子质量约为31 400和38 200的融合蛋白,Western-blot 检测结果显示,表达蛋白均可与CDV 标准阳性血清呈阳性反应,表明原核表达的CDV H蛋白和F蛋白在反应原性上具有与天然H蛋白和F蛋白同样的特性,可作为CDV诊断用抗原,为CDV的免疫预防研究奠定基础.
2012, 33(3):421-423. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.030
摘要:采用改良的TCA/丙酮法提取叶片总蛋白,建立了一套适用于甜玉米叶片的蛋白质组学研究方法,并对蛋白溶解液、蛋白上样量、第一向IEF等电聚焦时间等条件进行了优化.用改进的蛋白溶解液提取叶片总蛋白,明显减轻了离子干扰造成的蛋白点横拖;500μg蛋白上样量的检出蛋白点最丰富,可达750个以上;延长8 000 V等电聚焦至30 000 Vh可获得良好的蛋白点分离效果;采用优化条件后的双向电泳参数,结果重复性较高,检出蛋白点的线性回归相关系数可达0.93以上.
2012, 33(3):427-428. DOI: 10.7671/j.issn.1001-411X.2012.03.032
摘要:报道了2011年8月在江西省东江源发现的霉草科Triuridaceae大柱霉草Sciaphila secundiflora Thwaites ex Bentham种群,这是江西省的新分布科.江西省东江源大柱霉草种群是目前中国大陆纬度较高的分布记录,这对探讨该属植物的起源与扩散机制有重要的理论意义.大柱霉草的标本存放于华南农业大学林学院植物标本室 (CANT) .
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